Monkeypox Metodi di Diagnosi
Monkeypox virus (MPXV), vaiolo e vaccinia appartengono tutti alla Orthopoxvirus genere. Monkeypox virus è principalmente trasmessa per gli esseri umani da roditori, primati e altri animali selvatici, E ha limitato umani-a-umani di trasmissione, causando una rara malattia zoonotic virali-monkeypox. Settembre 1st , 1970, il primo casi di MPXV umani sono stati identificati a Basankusu Ospedale in Congo. Monkeypox virus è principalmente trasmessa per gli esseri umani da roditori, primati e altri animali selvatici, E ha limitato umani-a-umani di trasmissione, causando una rara malattia zoonotic virali-monkeypox. Il i sintomi clinici di monkeypox sono simili a quelli di vaiolo, ma i sintomi sono più miti. Monkeypox principalmente si è verificato in aree remote di Centrale e Africa Occidentale, dove è vicino a foreste pluviali tropicali. Con l'adattamento per gli esseri umani, MPXV a poco a poco si è evoluto in due clades: Africa Centrale ramo (Congo Bacino) E Africa Occidentale ramo. Tra di loro, il Congo Bacino ramo ha più forte virulenza e trasmissibilità.
Introduzione per MPXV
Monkeypox virus è un virus avvolto DNA a doppia elica, che è molto dipendente dalla cellula ospite DNA e RNA di replica, e in grado di replicare in host citoplasma. Simile al virus dello stesso genere, MPXV è molto probabile che replicare la morphologically distinto intracellulare virus maturo (IMV) E extracellulare avvolto virus (EEV) in host citoplasma. IMVs hanno una robusta struttura fisica che facilita la trasmissione tra i padroni di casa, mentre la più fragile EEVs sono avvolto e limite di immunitario liquidazione da il padrone di casa. Quindi, EEVs sono più adatti per il virus-a-cell di trasmissione. MPXV può efficacemente infettare umani primaria monociti, eliminando locale T cellulare risposte inibendo la CD4 e CD8 T attivazione delle cellule, in modo che evitare sistemica immunosuppression e monitoraggio del sistema immunitario.
Diagnosi clinica di virus monkeypox
Il migliore diagnostica campioni per monkeypox provengono da lesioni cutanee: fluido da vescicole e pustules, E a secco croste. I campioni della lesione deve essere conservato in luogo asciutto, sterile tubi (come VTM) e mantenuto freddo. La diagnosi clinica di monkeypox deve prendere in considerazione altri disturbi rash come varicella, il morbillo, batterica infezioni della pelle, la scabbia, la sifilide, e di droga-correlati allergie. Lymphadenopathy nelle prime fasi della malattia può essere il solo clinica caratteristica che distingue monkeypox da varicella o vaiolo.
1. Microscopio elettronico biopsia
Sotto il microscopio elettronico, MPXV era di mattoni a forma di in citoplasma, con corpi laterali, E il nucleo centrale era di circa 200-300 nm di lunghezza. Dal momento che OPV caratterizzazioni sono morphologically indistinguibili, questo metodo non può confermare la diagnosi, ma in grado di suggerire che il virus appartiene al genere di Poxviridae.
2. Gene di rilevamento
2.1. In tempo reale di fluorescenza PCR quantitativa
Rilevamento di Routine di MPXV campioni di DNA in clinica e MPXV-infettati cell culture, con metodo PCR o in tempo reale PCR. La rilevazione è consigliato per eseguire in un livello di biosafety 3 struttura. In tempo reale PCR metodo dovrebbe essere utilizzato per rilevare la busta esterna proteina gene (B6R), DNA polimerasi gene, il conservati regione di E9L, DNA dipendente dalla RNA polimerasi subunit 18, rpo18 e F3L gene.
2.2. Restrizione lunghezza frammento di polimorfismo (RFLP)
PCR o restrizione lunghezza frammento di polimorfismo (RELP) può anche essere utilizzato per il rilevamento di MPXV DNA, ma RFLP è in termini di tempo e richiede virus cultura. RFLP di PCR prodotti richiede anche la digestione seguita da gel elettroforesi, che non può essere impostazioni l'approccio migliore in clinica dove velocità, la sensibilità, e specificità sono critici.
2.3. La tecnologia Next-generation sequencing (NGS)
Intero-genome sequencing con metodo di NGS rimane il gold standard per differenziare MPXV e altri orthopoxvirus (OPV) caratterizzazione, ma la tecnologia è costoso e a valle di elaborazione di sequenziamento dati richiede enorme computazionale di alimentazione. Quindi, NGS non può essere un adeguato approccio in risorsa-paesi limitati in sub-Saharan Africa. In tempo reale PCR è ancora il metodo preferito per la diagnosi di routine di MPXV in genetica tecnologia di prova, ma deve essere completato da on-site tecnologia di sequenziamento del genoma. Come ad esempio Oxford Nanopore MinION, fornisce in tempo reale dati del genoma virale, che è essenziale per epidemiologici evidence-based di intervento.
3. Immuno assay
Monkeypox virus test immunitario includono principalmente enzima-linked immunosorbent assay (ELISA) per rilevare IgG/IgM anticorpi e immunohistochemical di rilevamento di antigens virali. Immunochemical analisi di MPXV anticorpi in grado di distinguere da herpes virus. Antivirale anticorpi e T-le risposte sono stati vittima delle cellule per aumentare, mentre la malattia esordio, con monkeypox virus IgM e IgG rilevato nel siero intorno 5 giorni dopo l'inizio del rash e che dopo più di 8 giorni. Possibile MPXV infezione dovrebbe essere diagnosticata se IgM e IgG anticorpi sono presenti nel siero di unvaccinated gli individui con una storia di eruzione cutanea e grave malattia. UN positivo IgM ELISA test indica recente esposizione A MPXV, mentre un positivo IgG prova indica che il singolo è stato in precedenza esposto a MPXV attraverso vaccinazione o infezione naturale. La presenza di entrambi i IgM e IgG in un campione indica prima vaccinazione o l'esposizione a individui naturalmente infettati con MPXV. Tuttavia, orthopoxviruses sono serologically cross-reattiva, E antigene e anticorpi saggi non forniscono la conferma di monkeypox specificità, ma può essere fattibile per serological test in MPXV-aree endemiche.
RRiferimenti:
[1] Sarah Keasey, Christine Pugh, Alexander Tikhonov, et al. Proteomic Base della Risposta di Anticorpi per L'infezione da Virus Monkeypox Esaminati in Cynomolgus Macachi e un Confronto per la Salute Umana Vaiolo vaccinazione [J]. Plos uno, 2010, 5(12): e15547.
[2] Emmanuel Alakunle, Ugo Moens, Godwin Nchind, et al.Monkeypox Virus in Nigeria: Infezione Biologia, Epidemiologia, ed Evoluzione [J]. Virus, 2020, 12(11):1257.
